基因染料法PCR試劑盒(he)(50T)產品特(te)點：

◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與其他病毒無交叉反應，無非特(te)異(yi)性(xing)擴增；

◇高靈敏(min)度：檢(jian)測靈敏(min)度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系(xi)列(lie)所有試(shi)劑(ji)均采(cai)用(yong)相同的(de)體系(xi)和條件，可(ke)同時進(jin)行多個檢(jian)測；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準備物品：

清理液（A）：毫升

染色液（t B）：微升

稀釋(shi)液（C）：毫升

溶解液（tD）：毫升(sheng)

產品說明書(shu)：1份

基因(yin)染料(liao)法PCR試劑盒(50T)PCR反應的特異性(xing)決定因(yin)素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合(he)；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶(ba)基因的特異性(xing)(xing)與保(bao)守(shou)性(xing)(xing)。

其(qi)中引物與模板(ban)的正(zheng)確結(jie)合是關鍵(jian)。引物與模板(ban)的結(jie)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配(pei)對原則(ze)的。聚(ju)合酶合成反應的忠實性(xing)(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶耐高(gao)溫性(xing)(xing)，使反應中模板(ban)與引物的結(jie)合(復性(xing)(xing))可以在較(jiao)高(gao)的溫度下進行，結(jie)合的特(te)異(yi)性(xing)(xing)大大增加，被擴增的靶基因(yin)片段也就能保(bao)持很(hen)高(gao)的正(zheng)確度。再通過選擇特(te)異(yi)性(xing)(xing)和(he)保(bao)守性(xing)(xing)高(gao)的靶基因(yin)區，其(qi)特(te)異(yi)性(xing)(xing)程(cheng)度就更高(gao)。

(2) 靈敏度高

PCR產物(wu)的(de)生成(cheng)量是以指數方式(shi)增(zeng)加的(de)，能將皮(pi)克(pg=10-12g)量級的(de)起始(shi)待測模板擴增(zeng)到微克(ug=10-6g)水平。能從(cong)100萬個細胞中檢出(chu)(chu)一(yi)個靶細胞；在(zai)病毒的(de)檢測中，PCR的(de)靈敏度可達3個RFU(空斑形成(cheng)單位)；在(zai)細菌(jun)(jun)學(xue)中zui小檢出(chu)(chu)率為3個細菌(jun)(jun)。

(3) 簡便、快速

PCR反應(ying)用(yong)耐高溫的(de)Taq DNA聚合酶，一(yi)次性地將(jiang)反應(ying)液加好后，即(ji)在(zai)DNA擴增(zeng)液和水浴鍋上進行變性-退火(huo)-延伸反應(ying)，一(yi)般在(zai)2～4 小時完(wan)成擴增(zeng)反應(ying)。擴增(zeng)產物一(yi)般用(yong)電(dian)泳分析，不一(yi)定要(yao)用(yong)同位素，無放射性污染、易推廣(guang)。

(4) 對標本的純度(du)要求低

不需要分離病(bing)毒或細(xi)菌及培養細(xi)胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及總RNA均(jun)可作為擴增模板。可直接用(yong)臨床標本如(ru)血(xue)液(ye)(ye)、體腔(qiang)液(ye)(ye)、洗嗽(sou)液(ye)(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞、活PCR技術概論。

注意事項：

①加入試(shi)劑(ji)的順(shun)序應(ying)*，以保證所有反應(ying)板孔(kong)溫育的時間一(yi)樣。

②使用干(gan)凈(jing)的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試(shi)劑盒(he)說明(ming)書中標明(ming)的(de)(de)時間、加液的(de)(de)量及順序進行溫(wen)育操作。

④底(di)(di)物(wu)A應揮(hui)發(fa)，避(bi)免(mian)(mian)長時(shi)間打(da)開蓋子。底(di)(di)物(wu)B對(dui)光敏感，避(bi)免(mian)(mian)長時(shi)間暴(bao)露于光下。避(bi)免(mian)(mian)用手接觸，有毒。實驗(yan)完成后應立即讀取(qu)OD值。

⑤洗滌酶標板(ban)時應充分拍干，不要將吸水紙(zhi)直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次(ci)性的吸(xi)(xi)頭以免交叉(cha)污染，吸(xi)(xi)取終止液和底物A、B液時(shi)，避免使用帶金(jin)屬部分(fen)的加樣(yang)器(qi) 。

⑦實驗中(zhong)(zhong)不用(yong)的板條應立即放回包裝袋(dai)中(zhong)(zhong)，密封保(bao)存，以(yi)免變質。

⑧試劑應(ying)按標簽說明(ming)書儲存(cun)，使用前恢復到室(shi)溫。稀稀過后的標準品(pin)應(ying)丟棄，不可保存(cun)。

⑨不用(yong)的其(qi)它試(shi)(shi)劑(ji)應包裝好(hao)或蓋好(hao)。不同批號的試(shi)(shi)劑(ji)不要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質前使(shi)用(yong)。

反應五要素：

參加PCR反應的物質主(zhu)要有(you)五種即引(yin)物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引(yin)(yin)(yin)物(wu)：引(yin)(yin)(yin)物(wu)是PCR特異性(xing)反應(ying)的(de)關鍵，PCR 產(chan)物(wu)的(de)特異性(xing)取(qu)決(jue)于引(yin)(yin)(yin)物(wu)與模(mo)板DNA互補的(de)程度(du)。理論上，只要知(zhi)道(dao)任何一段(duan)模(mo)板DNA序列(lie)， 就能按其(qi)設計互補的(de)寡核苷酸鏈(lian)做(zuo)引(yin)(yin)(yin)物(wu)，利用(yong)PCR就可將模(mo)板DNA在體(ti)外大量擴增。設計引(yin)(yin)(yin)物(wu)應(ying)遵(zun)循以(yi)下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右(you)。

②引(yin)物(wu)擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可(ke)擴增長至(zhi)10kb的片段。

③引物堿基：G+C含(han)量(liang)以40-60%為宜(yi)，G+C太少擴增效果(guo)不佳(jia)，G+C過多易出現非特(te)異條帶。ATGC機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧(mi)啶(ding)核苷酸(suan)的成串排(pai)列。

④避(bi)免引物(wu)內部出現二級(ji)結(jie)構，避(bi)免兩條(tiao)引物(wu)間互補，特(te)別是3'端(duan)的(de)互補，否(fou)則會(hui)形成引物(wu)二聚體，產生(sheng)非特(te)異的(de)擴(kuo)增條(tiao)帶(dai)。

⑤引物3'端(duan)(duan)的堿基(ji)，特別是末及(ji)倒(dao)數第二個堿基(ji)，應(ying)嚴格(ge)要求配對(dui)，以避免因末端(duan)(duan)堿基(ji)不配對(dui)而(er)導致PCR失(shi)敗。

⑥引物中有或(huo)能加上合(he)適的(de)酶(mei)切位點， 被擴增的(de)靶序(xu)列有適宜(yi)的(de)酶(mei)切位點， 這對酶(mei)切分析(xi)或(huo)分子克(ke)隆很有好處(chu)。

⑦引物(wu)的特異(yi)性(xing)：引物(wu)應(ying)與核酸序列(lie)數據庫的其它序列(lie)無明顯(xian)同源性(xing)。

引(yin)(yin)物(wu)量：每條引(yin)(yin)物(wu)的濃(nong)度(du)0.1～1umol或10～100pmol，以低引(yin)(yin)物(wu)量產生所(suo)需要的結果為(wei)好，引(yin)(yin)物(wu)濃(nong)度(du)偏高會引(yin)(yin)起(qi)錯配和非特(te)異(yi)性擴增(zeng)，且(qie)可(ke)增(zeng)加引(yin)(yin)物(wu)之間形(xing)成二聚體的機會。

10-酰(xian)基(ji)-3,7-二羥基(ji)吩嗪20mg

CCL26 Signal peptide核因子1A抗體(ti)

CCL26環一螺旋蛋白1抗體

chemerin腫瘤轉移抑制基因H4抗體

C5orf55 神經元衍生孤兒(er)受體1抗體

CXCR7軸(zhou)突生長誘(you)向(xiang)因子(zi)4抗體

COX7A2脊髓灰質炎(yan)病毒(du)受體相關蛋白4抗(kang)體

CD36細胞核(he)因(yin)子/k基因(yin)結合核(he)因(yin)子 p52/p100抗體

CYP11B2線粒體復合物NDUFS7蛋白抗(kang)體

基因染(ran)料法PCR試劑盒犀草進口/國產phospho-c-Abl(Thr754)  酸(suan)化非受(shou)體酪(lao)氨酸(suan)激酶(mei)c-Abl抗體含量：HPLC≥98%

木(mu)犀草苷進口/國產FUCA1/Alpha L fucosidase I  α-L巖藻糖苷酶抗(kang)體含(han)量：HPLC≥98%

沒食子酸進口/國(guo)產TNFR1/TNF Receptor I  腫瘤(liu)壞死(si)因子受體1抗體含量：HPLC≥98%

蒙花苷進口/國產HHV8/ORF K14  人類皰疹病(bing)8 ORF14抗(kang)體(ti)含量：HPLC≥97%

莽草(cao)酸進口/國產SEMA6D  軸(zhou)突導向因子(zi)SEMA6D抗(kang)體含量(liang)：HPLC≥98%

芹(qin)菜進口/國(guo)產plant lectin B4/IB4  植(zhi)物凝集IB4含(han)量(liang)：HPLC≥98%

青藤進口/國產SNX1/Sorting nexin1  分選連接蛋白1抗體含量：HPLC≥98%