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ELISA檢測結果解讀
點擊次數:546 更新時間:2023-04-23

   ELISA檢測結果可以定量、定性或半定量地解釋。在定量檢測中,使用已知標準的連續稀釋液來生成標準曲線,通常是光密度(OD)與濃度的關系。由此,可以計算出未知樣品中目標物的精確數量。

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                       ;標(biao)準曲線計算和ELISA實驗中未(wei)知(zhi)物目(mu)標(biao)濃度測定(ding)示例

  在定性檢測中,通(tong)(tong)常仍(reng)會通(tong)(tong)過(guo)使用酶(mei)標(biao)儀來收集數(shu)據,但結(jie)果(guo)將通(tong)(tong)過(guo)與沒有標(biao)準曲線的(de)空(kong)白和/或(huo)陰性孔的(de)比較來解釋為(wei)陽性或(huo)陰性。

  半定量檢測(ce)也是在(zai)不使用連續(xu)稀釋(shi)或標準(zhun)曲(qu)線的情況下收集數(shu)據(ju)。然而,包含(han)陰性和陽性標準(zhun),通(tong)常是高(gao)陽性和低陽性,有(you)利于相對比(bi)較未知樣本(ben)井(jing)和已知狀態的樣本(ben)孔之(zhi)間的水平。

通過使用這些標準(zhun)來監測檢測的可(ke)重復(fu)性,可(ke)以設定一(yi)個臨界(jie)(jie)值,超(chao)過臨界(jie)(jie)值的結(jie)果確定為陽性,低(di)于臨界(jie)(jie)值的為陰(yin)性。一(yi)些檢測方(fang)法可(ke)能還包括一(yi)個“灰區(qu)"。對于數值落在這個區(qu)域(yu)的樣品,建議(yi)重新測試或進一(yi)步調(diao)查(cha)。

  雖然定量檢(jian)測在(zai)某些情況(kuang)下可能(neng)是可取的(de)(de),但在(zai)每(mei)塊板上(shang)包含(han)一(yi)條(tiao)完整的(de)(de)標準曲(qu)線會占用寶貴的(de)(de)孔位。因此,根據用戶(hu)希望從(cong)檢(jian)測結果(guo)中獲得的(de)(de)信息,存在(zai)一(yi)種權(quan)衡。

  像許多(duo)(duo)檢測(ce)方法一(yi)樣,從ELISA獲得(de)的結(jie)果很(hen)少可能是100%準(zhun)確的,假陽(yang)性和假陰性結(jie)果都有可能。因此,大(da)多(duo)(duo)數測(ce)試將與靈敏(min)度和特異性相關(guan);它(ta)們越接(jie)近(jin)100%,測(ce)試就越好。

有許多因素(su)會影響這些值,例如:

1、非特異(yi)性結合或交叉反應的高背景;

2、抗體對(dui)其目標親和力差;

3、非最(zui)佳檢測(ce)條(tiao)件;

4、樣(yang)本條件和復(fu)雜性。

因此,計(ji)算靈(ling)敏度和特異性的(de)(de)數值是許多ELISA檢(jian)測方法發(fa)展的(de)(de)一(yi)個重要步驟,特別是在診斷環境中,以確定獲得(de)的(de)(de)任何結果的(de)(de)信息量和可靠性。